产品描述

PI-103是一种多靶点 PI3K 抑制剂，在无细胞试验中作用于p110α/β/δ/γ的IC50为 2 nM/3 nM/3 nM/15 nM，对 mTOR/DNA-PK的作用较小，IC50为30 nM/23 nM。

靶点（IC50 & Targe）

DNA-PK,23 nM (cell free)

p110α,2 nM (cell free)

p110β,3 nM (cell free)

p110γ,15 nM (cell free)

p110δ,3 nM (cell free)

mTOR,30 nM (cell free)

体外研究

PI-103有效抑制蛋白激酶mTOR的对apamycin敏感的(mTORC1)和对rapamycin不敏感的(mTORC2)复合物。PI-103是第三大多靶点PI3K抑制剂。[1]PI-103抑制组成型和生长因子诱导的PI3K/Akt和mTORC1激活。在胚细胞中，尤其在白血病干细胞中，PI-103抑制白血病细胞增殖和白血病前体细胞形成集落，且诱导线粒体细胞凋亡。PI-103抑制p110α的效果比抑制p110β强200倍以上。PI-103也有效抑制脂肪细胞中的PI(3,4)P2和PIP3，及肌管中的PIP3。与LY294002抑制Akt磷酸化的IC50值相比，PI-103抑制Akt磷酸化的IC50值要低到100倍。PI-103保护动物使其免受胰岛素刺激而导致的血糖降低。PI-103和etoposide联用作用于胚细胞和不成熟的白血病细胞有增强凋亡的功效。[2]

体内研究

当肿瘤达到50-100 mm3时, 动物随机分组，用PI-103处理，及空白对照处理。PI-103具有明显活性,处理18天后，使肿瘤平均尺寸降低4倍。用PI-103处理的鼠在发病前或验尸时没有明显毒性现象(根据体重，食物和水摄取情况，活动性, 及常规检查)。处理的肿瘤Akt和S6磷酸化水平明显降低,伴随着p110α和mTOR被抑制。PI-103处理神经胶质移植瘤，抑制生长。[2]

激酶实验

p110激酶实验:

加入含10 μCi γ-32P-ATP 的ATP开始反应，终浓度为10 或100 μM,在室温下进行20分钟。用于分析 TLC,加入105 μL 1 N HCl，然后加入160μL CHCl3:MeOH (1:1)，反应终止。涡旋两相混合物,简单离心，使用CHCl3预包被的凝胶上样吸头将有机相转移到新的试管中。TLC板上染色提取物，然后在n-丙醇:1 M乙酸的溶液中进行3到4小时。然后烘干TLC板, 然后用感光成像系统处理，再进行量化。测定PI-103,用10-12种浓度从实验所用最高浓度(100 μM)稀释2倍的抑制剂进行激酶活性测定。测定IC50重复进行2到4次，取几次独立测量的平均值。

细胞实验

Cell lines: U87MG细胞

Concentrations: 0.5 μM

Incubation Time: 24小时

Method: 评估细胞死亡，用PI-103处理U87MG细胞24小时。通过LDH活性的比色测定，用细胞毒性检测试剂盒测量细胞死亡。按公式:(实验值-低对照值)/(高对照值-低对照值)×100计算死亡百分率（3个12孔板每个实验点的平均值)，低对照细胞用DMSO处理的，高对照细胞用1% Triton X-100在37oC下处理30分钟。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 左前肢末端皮下注射U87MG:106个ΔEGFR 细胞的6到12周大Balbc nu/nu鼠

Formulation: 50% DMSO

Dosages: 5 mg/kg

Administration: 腹腔注射

(Only for Reference)

参考文献

[1] Knight ZA, et al. Cell, 2006, 125(4), 733-747.

[2] Fan QW, et al. Cancer Cell, 2006, 9(5), 341-349.

[3] Raynaud FI, et al. Mol Cancer Ther. 2009, 8(7), 1725-1738.