产品描述

PS-1145是一种特异性IKK抑制剂，IC50 为 88 nM。

靶点（IC50 & Targe）

IKK,88nM

体外研究

PS-1145通过抑制IkappaBalpha磷酸化阻断TNFalpha-诱导的NF-kappaB活化，并阻断IL-6对Dex-诱导的细胞凋亡的保护作用。PS-1145也会抑制BMSCs中MM细胞粘附引起的旁分泌MM细胞生长和IL-6分泌。[1]在人初级CD4(+) T细胞中，PS-1145废止细胞增殖，并通过CD3和CD28共同受体的参与阻碍响NF-κB 和 AP-1转录因子的活化。[2]

体内研究

在患有DMBA诱发的皮肤肿瘤的雄性Wistar大鼠中，PS-1145 (50 mg/kg, i.v.)通过上调p53，激活胱天蛋白酶，并下调NF-κB和VEGF因子，增强肿瘤细胞凋亡，从而诱导肿瘤进展。[3]

激酶实验

激酶试验:PS-1145溶于DMSO，在使用前储存于−20 °C。PS-1145对IKK复合物的Ki值通过测量Km和固定浓度抑制剂下的ATP测定。简而言之，部分纯化的IKK复合物从未刺激HeLa S3细胞得到，将其通过sf9中表达的MEKK1的催化域进行预激活。激酶活性使用生物素化的IκBα肽(250 μM，RHDSGLDSMKD，Km，肽= 30 μM，K m， ATP = 10 μM)和磷酸-Ser32-磷酸化抗体在ELISA中通过合适的标准曲线定量评估。对于PS-1145 Ki的测量，活化的IKK复合物首先与不同的固定浓度抑制剂(0.1–1 μM)在25 °C下预培养1小时。然后对MgATP的表观Km测量在每个单独的抑制剂浓度下进行。

细胞实验

Cell lines: MM.1S，U266，和 RPMI8226 细胞系

Concentrations: ~50 μM

Incubation Time: 48小时

Method: PS-1145对MM生长的抑制作用通过测量细胞的MTT染料吸光度进行评估。在48小时培养的最后4小时，将来自48小时培养物中的细胞用5 mg/ml MTT对每孔进行脉冲，然后用包含0.04N HCl的异丙醇进行脉冲。570 nm下的吸光度使用分光光度计测量。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 患有DMBA-诱发的皮肤肿瘤的雄性Wistar大鼠

Formulation: 以0.4 mg/mL溶于DMSO，并用 0.9% NaCl稀释

Dosages: ~50 mg/kg

Administration: i.v.

(Only for Reference)

参考文献

[1] Hideshima T, et al. J Biol Chem. 2002, 277(19), 16639-16647.

[2] Lupino E, et al. J Immunol. 2012, 188(6), 2545-2555.

[3] Rajmani RS, et al. Cell Biol Int. 2015, 39(11), 1317-1328.