辣根过氧化物酶底物 ——品种丰富，助力您的酶免技术

酶免技术常应用的酶有过氧化物酶和碱性磷酸酶，针对不同的酶，所作用的底物是不同的。过氧化物酶，通常来源于辣根，因此称为辣根过氧化物酶（Horseradish Peroxidase, HRP）。HRP具有分子量小、标记方法简单、性质稳定等优点，是临床检验试剂中一种常用的酶，被广泛用于生化检测项目及免疫类（ELISA）试剂盒。

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HRP发色底物

辣根过氧化物酶发色底物为过氧化物和供氢体（DH₂），其真正底物是H₂O₂，人们往往习惯把供氢体称为底物或统称供氢体底物。在ELISA中常用的供氢体有以下几种：

1、OPD是ELISA技术中应用较多的供氢体，酶作用后显黄色（最大吸收波长为492 nm），灵敏度高，测定方便。

2、TMB是近年来常用的一种供氢底物，经酶作用后显天蓝色，目测对比度鲜明，加酸终止酶反应后变黄色（最大吸收波长为450 nm），易比色定量测定。

3、DAB供氢底物，其反应产物为不能溶解的棕色吩嗪衍生物，可用不同光镜观察。此种多聚物还能被还原和螯合四氯化碳，形成具有电子密度的产物，便于用电镜观察。

HRP的发光底物

鲁米诺（3-氨基邻苯二甲酰肼, Luminol）或其衍生物如异鲁米诺（4-氨基邻苯二甲酰肼，Isoluminol），是一类重要的发光试剂。用HRP标记抗体，进行免疫反应后，利用鲁米诺作为发光底物，在HRP和起动发光试剂（NaOH + H₂O₂）作用下，鲁米诺发光，发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。反应过程如下图所示：

328061

521-31-3

Luminol, 98%
鲁米诺

1g, 5g, 25g

246853

3682-14-2

Isoluminol, 98%
异鲁米诺

1g, 10g