雷晓光教授科研成果 | 高效CXMS交联剂Leiker——用于复杂蛋白样品分析，可富集、可定量

化学交联结合质谱技术 (chemical cross-linking coupled with mass spectrometry, CXMS) 十年来蓬勃发展，广泛应用于蛋白质结构鉴定和蛋白质相互作用分析。 然而， CXMS技术可利用的化学交联剂有限， 交联效率不够高， 限制了该技术的应用^[1]：

• 对复杂样品的处理效率偏低
• 能够提供的交联信息有限

近期，北京大学雷晓光教授开发的新型赖氨酸特异性可富集型交联剂——Leiker，可实现复杂蛋白质样品高效、定量检测^[1]。

Leiker的结构特点：

图1：（A）Leiker包含一条9.3-Å碳链， 两端各连接一个磺基-NHS酯， 可将两个赖氨酸交联在一起； 还含一个用于亲和纯化的生物素标记结构（洋红色部分）， 一个裂解位点（箭头所指位置）， 以及可用同位素标记的六个氢原子（星号标记）——可用来将交联肽从链霉亲和素磁珠上释放出来^[1]。（B）Leiker结合多肽的纯化流程（C）Leiker结合多肽的三种方式

Leiker与传统交联剂BS³相比，有如下优点：

可有效富集97%以上多肽，实现复杂蛋白样品高效分析

图2：Leiker allowed near 100% enrichment of target peptides from a cross-linked ten-protein mixture diluted with increasing amounts of non-cross-linked E. coli lysates.

交联效率高10倍以上

图3：CXMS analyses of E. coli and C. elegans lysates. The best protein-protein interaction cluster extracted from the Leiker-identified or BS3-identified (Yang et al., 2012) inter-links from E.coli whole-cell lysates.

氘代同位素标记的d₆-Leiker可实现CXMS定量分析

例：L7Ae-RNA 复合物定量分析

图4：Reciprocal labeling of RNA-free (F) and RNA-bound (B) L7Ae with [d₀]/[d₆]-Leiker.

百灵威向全球科学家提供雷晓光教授科研成果转化的Leiker系列产品：

1. Tan D, Li Q, Zhang M J, et al. Trifunctional cross-linker for mapping protein-protein interaction networks and comparing protein conformational states. Elife Sciences, 2016, 5.

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