β-半乳糖苷酶高效显色底物—X-Gal

β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）一般是指能将β-半乳糖苷水解为半乳糖和糖苷的酶，早先被作为大肠杆菌诱导酶的典型。在生物研究中，常用与此酶对应的底物来检测酶的活性，从而可轻易地检测出结构基因的表达。

X–Gal是β-半乳糖苷酶的显色底物，水解后呈蓝色。基于这个特点，pUC系列载体DNA（或其他带有lacZ基因载体的DNA）以LacZ缺失细胞为宿主进行转化时，或用M13噬菌体载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG，由于β–半乳糖苷酶的α–互补性，即可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而很方便地挑选出基因重组体。具体反应如下图所示：

产品编号：440990

cas：7240-90-6
5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D
galactopyranoside X-Gal, 99%
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷

使用说明

首先把X-Gal配制成20mg/ml的二甲基甲酰胺（DMF）溶液（-20℃避光保存），然后在100ml的琼脂培养基中，加入200μl的上述溶液、100μl的IPTG（24mg/ml）和100μl的Amp（100mg/ml），制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培养基。当DNA片段插入至pUC系列载体（或其他带有lacZ、Amp基因载体），然后转化至lacZ缺失细胞中后，涂布上述的X–gal、IPTG、Amp平板培养基，可根据长出菌体的蓝白色，而方便地挑选出基因重组体（白色为具有DNA插入片段的基因重组体）。

注意事项

1. 培养噬菌体时，Top agar中的添加量为：50 μl/3ml（20mg/ml）。

2. 含有X-Gal的培养基应4℃避光保存，且须在1~2周内使用完。