食用植物油中辣椒素的两种固相萃取检测方法

辣椒素类物质被广泛应用于食品工业中。正常情况下，食用植物油中不含或仅含有微量辣椒素，而地沟油的制作由于不能很好地去除辣椒素，因此在地沟油中均能检测出高含量辣椒素。辣椒素成为检验食用油是否为地沟油的典型标志物。

本文介绍两种固相萃取法，分别以C18小柱和Silica小柱作为前处理方式测定食用植物油中辣椒素含量。两种方法均可用于“地沟油”中辣椒素含量的检测。

方法一

一、样品提取

准确称取0.5g试样于50mL离心管中，加入500µL二氯甲烷，再加入3mL 2%NaOH溶液，涡旋10min，混匀，4000r/min离心10min，移出水层，残余物再用3mL 2%NaOH溶液重复提取一次，合并水相，用稀硫酸（水：浓硫酸=1:15，v/v）调节pH至2～3之间，备用。

二、样品净化（973436C18固相萃取小柱，填料500mg,柱体积6ml）

活化：C18柱使用前用5mL乙腈、5mL水活化。
上样和洗脱：取备用液全部过柱，弃去流出液；加5mL水淋洗，弃去流出液；抽干小柱，加5mL乙腈洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程流速控制在1mL/min内）。
上机测试：洗脱液于50℃氮吹至近干，用1mL 80%甲醇水溶液溶解，经0.45µm有机滤膜过滤，供上机测试。

三、仪器条件

色谱柱：InertSustain-C18 (4.6mm×250mm，5µm)
检测器：Waters2475荧光检测器
检测波长：激发波长：229nm；发射波长：320nm
流动相：A：水 B：甲醇
洗脱方式：等度洗脱，A：B=20：80
流速：1.0mL/min
进样体积：20µL

四、检测结果

方法二

一、样品提取

准确称取2.0g试样于50mL离心管中，加入10mL正己烷，振荡提取10min，备用。

二、样品净化（937117 Silica固相萃取小柱，填料500mg,柱体积6ml

活化：Silica柱使用前用5mL甲醇洗去杂质，再5mL丙酮活化，5mL正己烷平衡。
上样和洗脱：取备用液全部过柱，弃去流出液；加5mL正己烷到提取管中，混匀，全部转移到柱中，弃去流出液；加5mL20%乙酸乙酯/正己烷溶液（1:4，v/v）淋洗，弃去流出液，抽干小柱；用4mL甲醇洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程流速控制在1mL/min内）。
上机测试：洗脱液用甲醇定容至4mL，经0.22µm滤膜过滤，供上机测试。