SDS-PAGE实验指南:解密蛋白质分析的“分子尺”

时间: 2025-08-04
作者: 百灵威
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SDS-PAGE实验指南:解密蛋白质分析的“分子尺”-百灵威

SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)是分离蛋白质的核心技术,原理是利用电场驱动带电蛋白质通过凝胶网状结构,按分子量大小分离。凝胶由丙烯酰胺和交联剂(Bis)聚合而成,Tris缓冲液维持pH,SDS使蛋白质均匀带负电并线性化,而过硫酸铵(APS)和TEMED催化聚合反应。电泳时,Tris-甘氨酸缓冲液形成离子梯度,推动蛋白质迁移,溴酚蓝指示前沿。

实验后,考马斯亮蓝或银染显色蛋白质条带,脱色液去除背景。上样缓冲液含还原剂(如DTT)和二硫键,确保蛋白质完全解聚。分子量标准(Marker)是关键参照。该技术广泛应用于蛋白质纯度检测、分子量估算及Western Blot前处理,兼具操作简便性和可靠性,是分子生物学研究的基石工具。
凝胶制备试剂
单体溶液
品名 CAS 货号
Acrylamide, 99%, Electrophoresis Grade
丙烯酰胺
79-06-1 911990
危化品
N,N'-Methylenebisacrylamide, 99%, Electrophoresis Grade
N,N'-亚甲基双丙烯酰胺
110-26-9 977281
缓冲系统
品名 CAS 货号
Tris(hydroxymethyl)aminomethane, 99.5%, extra pure
三(羟甲基)氨基甲烷
77-86-1 226162
Sodium dodecyl sulfate, 99%, for electrophoresis
十二烷基硫酸钠
151-21-3 160975
催化剂与引发剂
品名 CAS 货号
Ammonium persulfate, 98%, for analysis
过硫酸铵
7727-54-0 173322
危化品
N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine, 99%
N,N,N',N'-四甲基乙二胺
110-18-9 255989
危化品
电泳缓冲液
Running Buffer
品名 CAS 货号
Tris(hydroxymethyl)aminomethane, 99.9%, for Electrophoresis
三(羟甲基)氨基甲烷
77-86-1 989416
Glycine, 98%, for bio
甘氨酸
56-40-6 994869
Sodium dodecyl sulfate, 99%, for biochemistry
十二烷基硫酸钠
151-21-3 105893
样品处理试剂
Loading Buffer
品名 CAS 货号
Tris(hydroxymethyl)aminomethane, 99.5%, for bio
三(羟甲基)氨基甲烷
77-86-1 966222
Sodium dodecyl sulfate, 99%, for electrophoresis
十二烷基硫酸钠
151-21-3 160975
Bromophenol Blue, for analysis, Indicator
溴酚蓝
115-39-9 978967
Glycerol, 99%
甘油
56-81-5 262536
2-Mercaptoethanol, 99%, for electrophoresis and molecular biology
2-巯基乙醇
60-24-2 249096
危化品
DL-Dithiothreitol, 98%
DL-二硫苏糖醇
3483-12-3 973723
蛋白质染色与脱色试剂
考马斯亮蓝染色法
品名 CAS 货号
Brilliant Blue R, dye content 70%
考马斯亮蓝R
6104-59-2 345271
Methanol, 99.7%, guaranteed reagent
甲醇
67-56-1 989363
危化品
Acetic acid, 99.8%
乙酸
64-19-7 531036
危化品
Formaldehyde, 37% solution in H2O, stabilized with MeOH
甲醛
50-00-0 226396
危化品
其他辅助试剂
品名 CAS 货号
DNA Marker, Band:100, 250, 500, 750, 1000, 2000 bp
DNA分子量标准
/ 994220
Water, LC-MS
7732-18-5 965057
Isopropanol, 99.5%, for analysis
异丙醇
67-63-0 998869
危化品
耗材和小型仪器
品名 CAS 货号
Pipette tips, 10 μL, clear, 1000 tips/pack
移液器吸头
/ 920067
Single-channel mechanical pipettor, Volume range: 0.1-2.5μL, Increment: 0.05μL
单道手动可调移液器
/ 991313
Centrifuge tube, 50 mL, vertical, with scale, conical bottom, sterile, 25 pcs/bag, 2 bags/case
离心管
/ 958546
PCR tubes, 0.2 mL, individual, attached flat cap,fluorescent quantitation, 500 tubes/pack
PCR单管
/ 1438746
PCR tubes, 0.2 ml, strips of 8, thin-wall, 125 strips/pack
PCR条管
/ 996430
PCR tube caps, suitable for 0.2 ml RTPCR, strips of 8, flat cap, 125 strips/pack
PCR管盖
/ 1438748
智慧实验室
品名 CAS 货号
FindMolecule ELN, Academic Pro.
ELN电子记录本系统服务
/ 9269009
Bio-Vanguard
品名 CAS 货号
Bio-Vanguard® Disinfectant Spray
清萨灵®消毒剂
/ 916670
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