DTNB即5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)，俗称Ellmann 试剂。在巯基化合物的存在下，无色的DTNB转变成黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸，由于5-巯基-2-硝基苯甲酸在412 nm处具有最大吸收，DTNB的吸收光谱并不干扰巯基的测定，所以DTNB常用于比色法测定蛋白质、多肽组织中的巯基；也可用于有机磷农药中毒的监测(胆碱酯酶测定)。

• 通过严格的质量检测，符合或高于行业标准；
• 大量供应。

产品编号：281281

5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid), 99%
5,5'-二硫双(2-硝基苯甲酸)

技术说明书

DTNB 即Ellmann 试剂通用的配置方法为：

准确称取0.198 g DTNB 用50 mM Na₂HPO₄（pH7.0）配制成50mL 溶液，存放于棕色瓶中，于暗处低温保存备用。注意事项：配置、储存时要避光。

以半胱氨酸中自由巯基的定量检测方法为例，具体操作为：

1. 试剂的配制：
   1. Tris-HCL 缓冲液（0.25 M）：DDW 准确配制后，用盐酸调节pH 8.3;
   2. 半胱氨酸标准溶液（1 mM）：准确称取0.017563g L- 半胱氨酸（175.63），用1 mL 甲酸溶解，以DDW 定容至100 mL；
   3. DTNB（分子量：396.35）标准溶液（10 mM）：准确称取0.198175 g DTNB 用50mM Na₂HPO₄（pH＝7.0）配制成50 mL 溶液，存放于棕色瓶中，于暗处低温保存备用；
   4. DTNB 分析溶液（0.1 mM）：由1 体积10 mM DTNB 标准液加99 体积0.25 M 的Tris 缓冲液配制而成，现用现配。
2. 标准曲线的制作：
   1. 25℃条件下，用Tris 缓冲液稀释L- 半胱氨酸标准液，配成梯度的稀释液（5.0 mL），其浓度分别为：0.00 mM、0.025 mM、0.05 mM、0.1 mM、0.15 mM、0.2 mM；
   2. 取上述各浓度溶液1mL 分别加入到5mL 预先恒温于25℃水中的DTNB 分析溶液，摇匀，准确静止10 min，立即于波长412 nm 处测定吸光度值（A），根据目的蛋白的吸光度在标准曲线上读出对应的浓度即可。

试剂

其他相关产品

相关文章