黄连中盐酸小檗碱的HPLC检测方法

时间: 2024-03-05
作者: 百灵威
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黄连中盐酸小檗碱的HPLC检测方法-百灵威
小檗碱,即黄连中带有苦味的最主要成分黄连素,是一种分布在各种天然草药中的异喹啉生物碱,以盐酸盐(盐酸小檗碱)的形式存在于黄连中。
小檗碱可用于治疗肿瘤、心血管疾病、高血压、各类炎症、细菌和病毒感染、腹泻、阿尔茨海默症等,具有较高药用价值。
样品前处理
一、样品提取
准确称取黄连0.5g,加入25mL水,加热煮沸10min(防止烧干),冷却至室温过滤。
再取25mL水淋洗提取物,最后定容至50mL;取5mL用水稀释至50mL,取5mL备用。
二、样品净化(2471244HLB小柱,填料60mg,柱体积3mL)
活化:HLB固相萃取柱使用前依次用3mL甲醇、3mL水活化。
上样和洗脱:往固相萃取柱中加入备用提取液,弃去流出液;加入3mL 15%甲醇水溶液淋洗,弃去淋洗液,抽干小柱;再用3mL甲醇溶液洗脱,收集洗脱液(整个上样、洗脱过程流速控制在1mL/min内)。
重新溶解:洗脱液于50℃下氮吹至近干,用甲醇定容至1mL,涡旋1min,过滤供HPLC测试。
分析检测
一、仪器条件
色谱柱:C18(4.6mm×250mm,5µm)
检测器:紫外检测器
检测波长:298nm
流动相:A:甲醇 B:0.1%甲酸水
进样体积:20µL
流速:1.0mL/min
洗脱方式:梯度洗脱
二、检测结果
表1 20.0mg/kg黄连中盐酸小檗碱的添加回收结果
图1 添加水平为20.0mg/kg黄连中盐酸小檗碱检测的液相色谱图
产品列表
品名 CAS 货号
Berberine chloride, 99.5%, reference material
盐酸小檗碱
633-65-8 969907
Formic acid, 98%, for analysis
甲酸
64-18-6 965653
危化品
Methanol, 99.5%, for analysis
甲醇
67-56-1 949300
危化品
HLB SPE Cartridges, bed wt. 60 mg, volume 3 ml, 50 pcs/pack
HLB 固相萃取小柱
/ 2471244
C18-H HPLC column, 250*4.6 mm 5 μm, 120 Å, PH 1.5-10.5
C18-H 液相色谱柱
/ 1122769
Centrifuge tubes, 50 mL, round bottom, 50 tubes/pack
离心管
/ 977974
Hydrophilic PTFE syringe filter, non-sterile, 13mm, 0.2µm, red, 200 pcs/pack
亲水 PTFE 针式过滤器
/ 970251
Pipette tips, 5 ml, wide mouth, short style
移液器吸头
/ 977396
Short screw thread vials, 2ml, 9mm, 11.6×32mm, amber, large opening, first grade hydrolyzed glass
短螺纹样品瓶
/ 998015
Short screw thread vial caps and septa, 9 mm blue pp cap, centre hole 6 mm, red PTFE/white silicone septum
短螺纹样品瓶组合盖垫
/ 992414
Single-channel mechanical pipettor, Volume range: 1 - 5 mL, Increment: 50 μL
单道手动可调移液器
/ 970888
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