离子交换色谱柱是对蛋白、多肽、核苷酸以及抗体等大分子分析非常有效的分析检测和分离纯化手段。

分离原理

基于样品离子与流动相离子竞争占领离子交换剂上带相反电荷的位点而达到分离（图1）。

分离优势

1、 多孔性，表面积大、交换容量大，回收率高。
2、可加入少量有机改性剂以改变分离选择性。
3、可通过控制流动相的pH值和离子强度来调节组分保留值。

适用范围

1、 蛋白及抗体的电荷异质体的研究。
2、 蛋白样品糖基化前后的结构研究。
3、 寡核苷酸片段分析。
4、 不同聚合单位的寡聚糖分析。

选型提示

1、 离子交换色谱适用前提为目标分析物与其他组分或杂质存在带电量或pI差异。
2、 阳离子交换柱上，只有pI＞流动相pH的蛋白质有保留，pI≤流动相pH的蛋白质无保留，即使其pI有差异，也都作为溶剂峰被直接冲出。被保留蛋白质出峰顺序为pI小先出峰。
3、 阴离子交换柱情况相反。

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