Western Blot（蛋白质免疫印迹）是分子生物学中用于检测特定蛋白质表达的关键技术。其原理基于SDS-PAGE电泳分离蛋白质，再通过转膜将蛋白转移到固相载体（如PVDF膜），最后利用抗体特异性结合目标蛋白并进行显影分析。该方法广泛应用于疾病研究、药物开发和基础科研，具有高特异性和灵敏度，是验证基因表达和蛋白功能的重要工具。

实验流程主要包括样品制备、电泳分离、转膜、抗体孵育和信号检测。每一步需严格控制条件，如蛋白浓度、抗体效价和封闭时间，以确保结果准确性。Western Blot技术虽操作复杂，但通过标准化步骤和严谨优化，可稳定获得可靠数据，为生命科学研究提供有力支持。

样品制备

裂解缓冲液

品名	CAS	货号
Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride, 99%, for bio 三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐	1185-53-1	165488促
Sodium chloride, 99.5%, AR 氯化钠	7647-14-5	990049
4-Nonylphenyl-polyethylene glycol 4-壬基苯基-聚乙二醇	9016-45-9	931454 危化品
Dodecyl sodium sulfate, 99%, for ion pair chromatography 十二烷基硫酸钠	151-21-3	953543新
Sodium deoxycholate, 97%, for bio 去氧胆酸钠	302-95-4	927090
α-Toluenesulfonyl fluoride, 98.5% α-甲苯基磺酰氟	329-98-6	945600
Sodium Orthovanadate 正钒酸钠	13721-39-6	SY010520

蛋白定量

品名	CAS	货号
BCA(Bicinchoninic Acid)蛋白定量试剂盒 BCA(Bicinchoninic Acid)蛋白定量试剂盒	/	BCA1
Coomassie Brilliant Blue G, for electrophoresis 考马斯亮蓝G	6104-58-1	327499

上样缓冲液

品名	CAS	货号
2-Mercaptoethanol, 99%, for electrophoresis and molecular biology 2-巯基乙醇	60-24-2	249096促 危化品
Bromophenol Blue, 90%, AR 溴酚蓝	115-39-9	911254

SDS-PAGE电泳

凝胶成分

品名	CAS	货号
Acrylamide, 99%, Electrophoresis Grade 丙烯酰胺	79-06-1	911990 危化品
N,N'-Methylenebisacrylamide, 99%, Electrophoresis Grade N,N'-亚甲基双丙烯酰胺	110-26-9	977281
Tris(hydroxymethyl)aminomethane hydrochloride, 99%, for bio 三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐	1185-53-1	165488促
Dodecyl sodium sulfate, 99%, for ion pair chromatography 十二烷基硫酸钠	151-21-3	953543新
Ammonium persulfate, 98%, for electrophoresis 过硫酸铵	7727-54-0	977625 危化品
N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine, 99% N,N,N',N'-四甲基乙二胺	110-18-9	255989 危化品

电泳缓冲液

品名	CAS	货号
Tris(hydroxymethyl)aminomethane, 99.5%, for bio 三(羟甲基)氨基甲烷	77-86-1	966222促
Glycine, 98%, for bio 甘氨酸	56-40-6	994869
Dodecyl sodium sulfate, 99%, for ion pair chromatography 十二烷基硫酸钠	151-21-3	953543新

蛋白Marker

品名	CAS	货号
2-[2-(3,5-Dihydroxy-phenyl)-ethyl]-4,6-dihydroxy-benzoic acid ethyl ester 2-[2-(3,5-二羟基-苯基)-乙基]-4,6-二羟基-苯甲酸乙酯	365542-95-6	1411222

转膜（湿转法）

转膜缓冲液

品名	CAS	货号
Methanol, 99.5%, for analysis 甲醇	67-56-1	949300新 危化品
Microporous membrane filters, hydrophobic PVDF, non-sterile, white, Ф25, 0.22μm, 200 pcs/pack 微孔滤膜	/	979761
Qualitative filter paper, medium fast, φ12.5cm, 100 pieces/pack 定性滤纸	/	973268

封闭

封闭剂

品名	CAS	货号
Skim Milk 脱脂奶粉	/	S917757
Bovine serum albumin, 98%, Australia origin, low IgG, low fatty acid 牛血清白蛋白	9048-46-8	109636
Tween 20 吐温 20	9005-64-5	983704

孵育

品名	CAS	货号
Western blot anti dilution solution Western blot-抗稀释液	/	9456147
Western Blot Antibody Dilution Buffer Western Blot 抗体稀释液	/	9456321
Tween20/TBS solution, 20×TBST, pH 7.5 Tween20/TBS溶液	/	9456146
Tris buffer salt powder, 1×TBS Tris缓冲盐粉剂	/	9456145

显影

ECL发光试剂

品名	CAS	货号
Super ECL Plus Detection Reagent (component A), used with 1912570 Super ECL Plus超敏发光液(A液)	/	946079
Super ECL Plus Detection Reagent (component B), used with 946079 Super ECL Plus超敏发光液(B液)	/	1912570
Luminol reagent 鲁米诺显色剂	521-31-3	925118
4-Iodophenol, 99% 4-碘苯酚	540-38-5	397011 危化品

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