Hayflick培养基是一种专门用于支原体培养的培养基。由于支原体是一类没有细胞壁的微生物,它们对靶向细胞壁合成的抗生素(如青霉素)不敏感,且不能合成胆固醇等脂类物质和核苷酸类物质,因此在培养过程中需要添加这些外源性的成分以支持其生长。Hayflick培养基通常被推荐用于生物医药产品中支原体的一般检测,其配方是根据欧洲药典的建议配制的。该培养基含有马血清,用以提供胆固醇和其他必需脂肪酸;脱氧核糖核酸,用以提供嘌呤和嘧啶;以及酚红,作为pH指示剂。培养基的颜色变化可以直观地表明支原体的生长情况。
牛心消化液(或浸出液)1000mL,蛋白胨10g,NaCl 5g,琼脂15g,pH7.8~8.0,分装每瓶70mL,121℃湿热灭菌15min,待冷却至80℃左右,每70mL中加入马血清20mL,25%鲜酵母浸出液10mL,15%醋酸铊水溶液2.5mL,青霉素G钾盐水溶液(20万U以上)0.5mL,混合后倒平板。注意:醋酸铊极毒,需特别注意安全。
百灵威可提供该染色液配制所需相关试剂:
| 品名 | CAS | 货号 |
|---|---|---|
| Peptone 蛋白胨 | 73049-73-7 | 146972 |
| Sodium chloride, 99.5%, AR 氯化钠 | 7647-14-5 | 990049 |
| Agar 琼脂粉 | 9002-18-0 | 282583 |
| D-(+)-Glucose, 99%, reference material D-(+)-葡萄糖 | 50-99-7 | 903028新 |
| Sodium hydroxide, 96%, AR flaky 氢氧化钠 | 1310-73-2 | 935116 危化品 |
| Water, HPLC grade 水 | 7732-18-5 | 187553 |